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      2. 農桿菌介導的pCB302-3載體在本氏煙中瞬時表達條件優化
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        國家“863”項目(2013AA102603);國家自然科學基金項目(31171603);教育部博士點基金項目(20110146110019)


        Optimizing agroinfiltration-mediated transient expression in Nicotiana benthamiana using pCB302-3 vector
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          摘要:

          以GFP為報告基因構建植物表達載體pCB302-3-GFP,采用農桿菌葉片注射法對其在本氏煙葉片中瞬時表達條件進行優化。分析基因沉默抑制子p19、菌液不同濃度以及侵染時間對GFP熒光強度的影響,結果顯示,當農桿菌菌液D600 為0.8~1.0并與含有p19基因的載體共注射條件下,農桿菌注射3~5 d后本氏煙草葉片表現出很強的綠色熒光,實現了GFP在本氏煙草中的高效瞬時表達。

          Abstract:

          pCB302-3 is a plant mini-binary stable transformation vector.To investigate the transient expression of pCB302-3 vector in plant,GFP was inserted into pCB302-3 vector as a reporter gene,and various factors including density of Agrobacterium cell,supplementation of gene silencing suppression p19 and days post infiltration were optimized based on agroinfiltration method in Nicotiana benthamiana leaves.Results showed that high levels of GFP expression were observed in N.benthamiana leaves 3-5 d after infiltration by Agrobacterium cell suspension contained pCB302-3-GFP with an optical density (D600) of 0.8-1.0 co-infiltrated with p19 gene.

          參考文獻
          相似文獻
          引證文獻
        引用本文

        孫春蓮,王洪洋,田振東.農桿菌介導的pCB302-3載體在本氏煙中瞬時表達條件優化[J].華中農業大學學報,2015,34(3):8-12

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        歷史
        • 收稿日期:2013-11-30
        • 最后修改日期:
        • 錄用日期:
        • 在線發布日期: 2015-03-30
        • 出版日期:
        牌九游戏